ИФА (без задачи)
Иммуноферментный анализ (ИФА) — это высокоточный лабораторный метод, который используют для поиска в биоматериале (обычно в крови) специфических антител или антигенов. Одним из ключевых элементов этого метода являются ИФА-планшеты, а сами результаты строго документируются в медицинских протоколах
ИФА-планшеты — это небольшие пластиковые панели, чаще всего из полистирола, предназначенные для проведения реакции на 96 образцах одновременно . По сути, это 96 отдельных «пробирок» (лунок), объединенных в одной рамке. Планшет помещают в спектрофотометр (ридер), который просвечивает лунки и выдает первичные значения — оптическую плотность (ОП) . Лаборант строго фиксирует время реакции, так как цвет может меняться.
Значения оптической плотности переносятся в документ "ИФА-планшет", в котором производятся расчеты. Далее ИФА-планшет подписывается и создаются неподписанные результаты, которые далее уже можно отобрать в свод. Расчеты в ИФА планшете вычисляются по ключевым этапам анализа :
-
-
Фоновая коррекция: Вычитается значение «холостой» пробы (Blank) для устранения фонового шума .
-
Контроль качества: Система проверяет, укладываются ли показатели контрольных образцов в заданные пределы (действителен ли тест) .
-
Расчет порога (Cut-off): Рассчитывается критическое значение оптической плотности, разделяющее положительные и отрицательные образцы .
-
Интерпретация: Программа автоматически сравнивает значения образцов с пороговым (Cut-off) и выдает результат: «Положительно» или «Отрицательно» .
-
Валидация и отчет: Программа строит калибровочные кривые и рассчитывает коэффициенты вариации (CV) для контроля точности дозирования .
-
-
1. Настройка методики
Этапы работы с документом ИФА-планшет: - 2. Настройка передачи данных с фотометра
- 3. Создание документа и заполнение результатов
4. Создание свода с подготовленными результатами и подписание готовых протоколов
1. Настройка методики
Методика для ИФА-планшета — это строго регламентированный, пошаговый алгоритм (протокол), который описывает, как именно нужно поставить иммуноферментный анализ, чтобы получить достоверный результат. Заполняется по методическим указаниям производителя реагентов.
Для открытия справочника методик:
Справочники - Лаборатория - ИФА - ИФА-методики
Откроется справочник ИФА-методики:
Выбрав нужную методику, необходимо произвести её настройки, нажав на значок редактировать или открыв методику двойным щелчком левой кнопкой мыши:
Далее обязательно нужно указать:
1. Основные настройки:
1) Выбрать из справочника анализ, который проводится с использованием данной методики - указывается в качестве значения по умолчанию для подстановки в документ «ИФА-планшет», чтобы не выбирать каждый раз при создании документа вручную) Рис. (1)
2) Указать длину волны основного фильтра Рис. (2)
3) Указать длину волны дополнительного фильтра (при наличии) Рис. (3)
4) Указать количество лунок, используемых для каждого пациента (2, если исследование проводится «в дублях») Рис. (4)
5) Указать, с какой лунки начинаются измерения пациентов (следующая лунка после контроля), в примере это лунка A2 Рис. (5)
2. Вкладка "Стандарты"
- Добавить необходимое количество калибровочных проб, с указанием соответствующих значений концентраций исследуемого вещества (номер точки редактировать без необходимости не нужно. Отсчёт начинается с «0»)
Калибровочные пробы (калибраторы) — это серия растворов с точно известной концентрацией определяемого вещества (антитела или антигена), входящая в состав набора реагентов для количественного иммуноферментного анализа (ИФА). Они являются «линейкой», с помощью которой измеряют концентрацию неизвестного образца
- Выбрать алгоритм апроксимации для построения калибровочной кривой
Алгоритм аппроксимации — это метод, который позволяет заменить сложную, неизвестную, или слишком «рваную» функцию на более простую и понятную, которая проходит рядом или близко к исходным данным:
-Линейный
-Сплайн Акимы
- Бикубический
- catmull-rom
- Линейная регрессия
- Универсальный полином
- мнк
-по 4 точкам
-по 5 точкам




